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課程名稱 |
重組DNA技術
RECOMBINANT DNA TECHNOLOGY |
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開課學期 |
97-2 |
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授課對象 |
生物資源暨農學院 園藝暨景觀學系 |
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授課教師 |
杜宜殷 |
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課號 |
HORT5031 |
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課程識別碼 |
628 U1640 |
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班次 |
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學分 |
3 |
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全/半年 |
半年 |
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必/選修 |
選修 |
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上課時間 |
星期二7,8,9,A,B(14:20~20:10) |
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上課地點 |
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備註 |
本系所學生優先。請先向授課教師登記。上課地點：轉殖溫室。
限學士班三年級以上
總人數上限：6人 |
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Ceiba 課程網頁 |
http://ceiba.ntu.edu.tw/972rec |
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課程簡介影片 |
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核心能力關聯 |
本課程尚未建立核心能力關連 |
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課程大綱
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為確保您我的權利,請尊重智慧財產權及不得非法影印
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課程概述 |
1. 大腸桿菌之接種及固體與液體培養
2. 噬菌體之灑佈培養
3. 噬菌體DNA之抽取
4. 噬質體DNA去蛋白處理及定量
5. 噬質體DNA之切
6. 製備性瓊脂洋菜凝膠電泳分析及膠體內DNA片段之回收
7. 回收DNA之估量及連結反應
8. 轉型質體至大腸桿菌
9. 轉型效率之估算
10. 質體DNA之小量製備 |
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課程目標 |
本課程係園藝學系大學部生物技術學群必選科目之一，提供大學部大三以上學生及研究生熟悉分子生物應用技術中，重組DNA技術所應用之原理、方法、儀器及藥品，以遺傳工程實驗最普遍運用之二種微生物--噬菌體及大腸桿菌為對象，安排實際操作基本的重組DNA技術，適合生物科學相關科系學生修習。
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課程要求 |
修習過分子生物或生物技術相關課程 |
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預期每週課後學習時數 |
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Office Hours |
每週四 15:30~17:20 |
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指定閱讀 |
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參考書目 |
1.Ausubel FM, Brent R, Kingston RE, Moore DD, Seidman JG, Smith JA, Struhl K (2004) Current Protocols in Molecular Biology. by John Wiley & Sons, Inc. Chichester, UK.
2.Ausubel FM, Brent R, Kingston RE, Moore DD, Seidman JG, Smith JA, Struhl K (2003) Short Protocols in Molecular Biology, 5th ed. John Wiley & Sons, Inc. New York.
3.Brown TA (2001) Gene Cloing and DNA analysis - An introduction. Blackwell Science Ltd.
4.Clark DP (2005) Molecular Biology - Understanding the Genetic Revolution. Elsevier Academic Press, USA.
5.Glick BR, Pasternak JJ (1998) Molecular Biotechnology: principles and applications of recombinant DNA. American Society for Microbiology.
6.Hackett PB, Fuchs JA, Messing JW (1984) An Introduction to Recombinant DNA Techniques. The Benjamin/Cummings Publishing Company, Inc.
7.Hardin C, Edwards J, Presutti D, Miller W, Robertson D (2001) Cloning, Gene Expression, and Protein Purification. Oxford University Press, Inc.
8.Micklos DA, Freyer GA (2003) DNA Science: A First Course. Cold Spring Harbor Laboratory Press.
9.Miesfeld RL (1999) Applied Molecular Genetics. Wiley-Liss, Inc.
10.Rapley R (2000) The Nucleic Acid Protocols Handbook. Humana Press Inc.
11.Rodriguez RL, Tait RC (1983) Recombinant DNA Techniques: an introduction. Addison-Wesley Publishing Company.
12.Sambrook J, David W, Sambrook J (2001) Molecular Cloning: a laboratory manual, 3nd ed, Vol. 1 and 3. Cold Spring Harbor Laboratory Press.
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評量方式
(僅供參考) |
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No. |
項目 |
百分比 |
說明 |
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1. |
課堂測驗 |
60% |
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2. |
隨堂報告 |
40% |
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週次 |
日期 |
單元主題 |
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第1週 |
2/17 |
大腸桿菌固體與液體培養基之配製 |
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第2週 |
2/24 |
大腸桿菌之固體與液體培養 |
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第3週 |
3/03 |
噬菌體固體與液體培養基之配製 |
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第4週 |
3/10 |
噬菌體之灑佈培養 |
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第5週 |
3/17 |
噬菌體之純化 |
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第6週 |
3/24 |
噬菌體DNA之抽取 |
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第7週 |
3/31 |
噬菌體DNA去RNA處理及定量 |
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第8週 |
4/07 |
噬菌體DNA限制切 |
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第9週 |
4/14 |
瓊脂洋菜凝膠電泳分析及膠體內DNA片段之回收 |
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第10週 |
4/21 |
回收DNA片段之估量 |
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第11週 |
4/28 |
回收DNA及載體之連結反應 |
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第12週 |
5/05 |
待轉型細胞之製備 |
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第13週 |
5/12 |
轉型質體至大腸桿菌 |
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第14週 |
5/19 |
轉型效率之估算，藍白篩選之觀察及接種 |
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第15週 |
5/26 |
重組質體DNA之小量製備 |
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第16週 |
6/02 |
重組質體DNA之切及電泳檢測 |
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第17週 |
6/09 |
期末考 |
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第18週 |
6/16 |
NULL |
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